Tillämpning av genpistol i fruktutveckling

Körsbär är en frukt som är relativt beroende av klimatet. Under fruktutvecklingen regleras dess mognad av abscisinsyra (ABA).

I denna studie användes en virusinducerad genavstängnings (VIGS) och partikel bombardemangsmetod för att identifiera fyra cDNA som kodar 8'-hydroxylas (ett nyckelenzym för oxidativ katabolism av ABA) i söta körsbärsfrukter. Deoxiribonukleinsyra) Paccyp707a1-a4

Paccyp707a2 reglerar negativt kirsebärfruktmognad och paccyp707a1 medierar torktolerans

Virusinducerad genavstängning (VIGS) hänför sig till viruset som infekterar en växt som bär ett målgenfragment, vilket kan inducera endogen genljudning, orsaka fenotypiska förändringar och sedan studera målgenens funktion baserat på fenotypisk variation.

Figur 1. Förändringar i ABA-biosyntes (pacnced1), ABA-katabolism (paccyp707as) och ABA-innehållsrelaterade gener under utveckling och mognad av söt körsbärsfrukt. (a) Absoluta transkriptnivåer av fyra pacyp707as under fruktutveckling. (b) Relativa transkriptnivåer ackumulerade av pcnced1 och aba under utveckling. Actin användes som en intern kontroll och dess uttryck detekterades av qrt-pcr.

Uttryck av pAccyp707a-genen i dehydreringsreaktionen

Frukten som samlats in från 32 dagar var uppdelad i två grupper och vattenförlusten var 16% vid 45% relativ fuktighet efter lagring i 3 dagar under förhållanden med låg relativ fuktighet (45%) och hög relativ fuktighet (100%). ABA-halten och pNCED1-transkriptionsnivån i frukter var signifikant högre än de i kontrollgruppen. Han styr (Figur 2). I motsats härtill var uttrycket av Paccyp707a1 signifikant nedreglerat efter dehydrering och uttrycket av Paccyp707a3 var också nedreglerat, om än i mindre utsträckning, och uttrycket av Paccyp707a4 och Paccyp707a2 påverkades inte av dehydrering (fig 2). Den mest signifikanta förändringen inträffade vid uttrycket av paccyp707a1, vilket kan vara den huvudsakliga torka-responsiva medlemmen av paccyp707a-genfamiljen under fruktmognad.

Paccyp707A2 gensläckning främjar fruktfärgning och mognad

Fruktens fenotyp behandlades med Paccyp707A1 / 2-RNAi. På den 28: e dagen efter blomningen valdes 90 frukter från tre körsbärsträd planterade i separata fruktträdgårdar och uppdelade i tre grupper om 30 vardera för virusinducerade genavstängningsförsök.

Paccyp707a1-rnai, paccyp707a2-rnai och kontroll-trv-vektorn (utan cyp707a-gen) injicerades i pediklerna av frukterna i grupperna 1, 2 respektive 3.

Frukten utvärderades 7 dagar efter ympningen.

(a) behandling av frukt (d) 28 dagar efter blomning;

(b) 43d för att behandla frukten;

(c) 43d trv vektorbehandling av frukt (ingen cyp707a-gen);

(d) 43 d av pacyp707a1-RNAi-behandlad frukt;

(e) paccyp707a2 RNAi-behandling av frukt;

(f) Paccyp707a2 RNAi behandlad frukt 6 dagar efter behandling (höger kontroll);

(g) paccyp707a1 RNAi 6 dagar efter fruktbehandling (kontrollfrukt till höger).